廣州醫(yī)學(xué)院第一附屬-醫(yī)院廣州呼吸疾病研究所
張清玲 謝佳星 賴克方 鐘南山

氣道反應(yīng)性測(cè)定在支氣管哮喘（簡(jiǎn)稱哮喘）的診斷、治療和療效的評(píng)估非常重要。鼠類價(jià)格低廉，擁有數(shù)以千萬(wàn)計(jì)的近親繁殖種屬，有最密集的已知基因標(biāo)志，是哮喘研究的標(biāo)模型。我們的研究目的在于探討小鼠氣道反應(yīng)性的檢測(cè)方法及質(zhì)量控制。目前比較成熟的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物肺功能檢查方法有體內(nèi)侵入性肺功能檢查法體內(nèi)非侵入性肺功能檢查法。

運(yùn)用美國(guó)的Buxco 公司生產(chǎn)的Buxco“RC”系統(tǒng)及Buxco “penh”系統(tǒng)比較OVA 組（于實(shí)驗(yàn)流程第0、7、14 天給予腹腔注射致敏10μg 的OVA＋1mg的Al（OH）3 生理鹽水混懸液200μl；實(shí)驗(yàn)流程第28 天給予滴鼻50μl 激發(fā)，n＝15）及對(duì)照生理鹽水組（于實(shí)驗(yàn)流程第0，7，14 天給予腹腔注射200μl 生理鹽水，實(shí)驗(yàn)流程第28 天給予50μl 生理鹽水滴鼻，方法同前，n＝14）的氣道反應(yīng)性的檢測(cè)結(jié)果。

發(fā)現(xiàn)使用整體體積描記系統(tǒng)檢測(cè)兩組小鼠的氣道反應(yīng)性，Mch 濃度為6.25、12.5、25 mg/ml 時(shí)，OVA 組（n＝8）Penh 上升的百分比較 生理鹽水組（n＝8）明顯升高；OVA 組PC100 Penh、PC200 Penh 顯著小于生理鹽水組（P＜0.01）。而在氣管插管（呼吸機(jī)輔助通氣）、食道內(nèi)壓測(cè)壓侵入性肺功能檢查法中兩組小鼠的氣道反應(yīng)性（RL）的變化差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。另外，OVA 組BALF 中嗜酸粒細(xì)胞百分比計(jì)數(shù)和細(xì)胞總數(shù)較對(duì)照組明顯增加，兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。OVA 組支氣管及血管周圍炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，并可見(jiàn)嗜酸粒細(xì)胞。生理鹽水組支氣管上皮為單層柱狀，無(wú)黏膜皺襞無(wú)水腫及炎性滲出。

提示在侵入性肺功能檢查法采取放置食道測(cè)壓管檢測(cè)胸腔內(nèi)壓，可以獲得經(jīng)肺壓，從而獲得肺阻力和肺動(dòng)態(tài)順應(yīng)性等金標(biāo)準(zhǔn)參數(shù)；在使用整體體積描記系統(tǒng)檢測(cè)氣道反應(yīng)性時(shí)，研究者必須要考慮到此法中吸入暴露包括了鼻和胃腸攝入，結(jié)果陽(yáng)性并不代表動(dòng)物氣道反應(yīng)性升高，因?yàn)樯虾粑溃òū?、咽、喉等）阻力的改變也?huì)影響實(shí)驗(yàn)的結(jié)果；侵入性檢查法的優(yōu)點(diǎn)是在檢查或激發(fā)時(shí)對(duì)動(dòng)物無(wú)壓力，可獲得肺阻力和肺動(dòng)態(tài)順應(yīng)性等金標(biāo)準(zhǔn)參數(shù)，且吸氣暴露聚焦于肺，因?yàn)楸潜┞侗慌懦?，因此如果研究者需要獲得敏感、準(zhǔn)確的肺功能參數(shù)；或?qū)嶒?yàn)需要控制性的經(jīng)下呼吸道肺投入給藥，并排除其他吸入途徑（如鼻、胃、皮膚）等；又或如在哮喘的某項(xiàng)研究中需要藥物在肺中有高沉淀劑量時(shí)，那么選擇侵入性檢查法比較好；WBP 系統(tǒng)檢測(cè)設(shè)置簡(jiǎn)單并可以同時(shí)檢查一組動(dòng)物，沒(méi)有了身體束縛，動(dòng)物呼吸更自然，可以同次同條件檢測(cè)多只實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，但此法應(yīng)該定位在實(shí)驗(yàn)者需要大批量的進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的篩查，或確定鼻暴露或胃腸吸入不是實(shí)驗(yàn)的干擾因素時(shí)（在哮喘動(dòng)物模型尤其應(yīng)注意到這個(gè)因素）；本研究的OVA 組動(dòng)物雖然存在血管、氣管周圍炎，Penh 上升較對(duì)照組明顯增高，但由于不能排除上氣道的影響，不能確定為哮喘模型。