廣州醫學院第一附屬-醫院廣州呼吸疾病研究所
張清玲 謝佳星 賴克方 鐘南山

氣道反應性測定在支氣管哮喘（簡稱哮喘）的診斷、治療和療效的評估非常重要。鼠類價格低廉，擁有數以千萬計的近親繁殖種屬，有最密集的已知基因標志，是哮喘研究的標模型。我們的研究目的在于探討小鼠氣道反應性的檢測方法及質量控制。目前比較成熟的實驗動物肺功能檢查方法有體內侵入性肺功能檢查法體內非侵入性肺功能檢查法。

運用美國的Buxco 公司生產的Buxco“RC”系統及Buxco “penh”系統比較OVA 組（于實驗流程第0、7、14 天給予腹腔注射致敏10μg 的OVA＋1mg的Al（OH）3 生理鹽水混懸液200μl；實驗流程第28 天給予滴鼻50μl 激發，n＝15）及對照生理鹽水組（于實驗流程第0，7，14 天給予腹腔注射200μl 生理鹽水，實驗流程第28 天給予50μl 生理鹽水滴鼻，方法同前，n＝14）的氣道反應性的檢測結果。

發現使用整體體積描記系統檢測兩組小鼠的氣道反應性，Mch 濃度為6.25、12.5、25 mg/ml 時，OVA 組（n＝8）Penh 上升的百分比較 生理鹽水組（n＝8）明顯升高；OVA 組PC100 Penh、PC200 Penh 顯著小于生理鹽水組（P＜0.01）。而在氣管插管（呼吸機輔助通氣）、食道內壓測壓侵入性肺功能檢查法中兩組小鼠的氣道反應性（RL）的變化差異無統計學意義。另外，OVA 組BALF 中嗜酸粒細胞百分比計數和細胞總數較對照組明顯增加，兩組比較差異有統計學意義（P＜0.01）。OVA 組支氣管及血管周圍炎性細胞浸潤，并可見嗜酸粒細胞。生理鹽水組支氣管上皮為單層柱狀，無黏膜皺襞無水腫及炎性滲出。

提示在侵入性肺功能檢查法采取放置食道測壓管檢測胸腔內壓，可以獲得經肺壓，從而獲得肺阻力和肺動態順應性等金標準參數；在使用整體體積描記系統檢測氣道反應性時，研究者必須要考慮到此法中吸入暴露包括了鼻和胃腸攝入，結果陽性并不代表動物氣道反應性升高，因為上呼吸道（包括鼻、咽、喉等）阻力的改變也會影響實驗的結果；侵入性檢查法的優點是在檢查或激發時對動物無壓力，可獲得肺阻力和肺動態順應性等金標準參數，且吸氣暴露聚焦于肺，因為鼻暴露被排除了，因此如果研究者需要獲得敏感、準確的肺功能參數；或實驗需要控制性的經下呼吸道肺投入給藥，并排除其他吸入途徑（如鼻、胃、皮膚）等；又或如在哮喘的某項研究中需要藥物在肺中有高沉淀劑量時，那么選擇侵入性檢查法比較好；WBP 系統檢測設置簡單并可以同時檢查一組動物，沒有了身體束縛，動物呼吸更自然，可以同次同條件檢測多只實驗動物，但此法應該定位在實驗者需要大批量的進行相關實驗動物的篩查，或確定鼻暴露或胃腸吸入不是實驗的干擾因素時（在哮喘動物模型尤其應注意到這個因素）；本研究的OVA 組動物雖然存在血管、氣管周圍炎，Penh 上升較對照組明顯增高，但由于不能排除上氣道的影響，不能確定為哮喘模型。