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寡核苷酸阻斷ROCK-1蛋白對(duì)人卵巢癌細(xì)胞惡性行為的影響

【?2008-04-28 發(fā)布?】 臨床報(bào)道  

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    該項(xiàng)研究目的是通過(guò)反義寡核苷酸(ASODN)對(duì)ROCK-1的特異性阻斷,探討ROCK-1蛋白在卵巢癌轉(zhuǎn)移中的作用。方法采用將ROCK-1反義寡核苷酸(ASODN)以脂質(zhì)體介導(dǎo),轉(zhuǎn)染人卵巢癌細(xì)胞系SW626和Caov-3細(xì)胞,采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)與Western blot印跡法,檢測(cè)轉(zhuǎn)染前后ROCK-1蛋白的表達(dá),Boyden小室觀察ROCK.1ASODN對(duì)SW626和Caov-3細(xì)胞侵襲及遷移能力的影響,采用二苯基溴化四氮唑藍(lán)(M1Tr)比色法,測(cè)定轉(zhuǎn)染前后細(xì)胞增殖及黏附能力的變化。結(jié)果轉(zhuǎn)染ROCK-1ASODN后,2株細(xì)胞內(nèi)ROCK-1蛋白的表達(dá)明顯減少,最大抑制率可達(dá)49.0%;細(xì)胞的侵襲能力受到明顯抑制,10μmol/L組和20μmol/L組SW626細(xì)胞的侵襲能力分別為對(duì)照組的75.6%±3.8%和54.7%±2.9%,Caov-3細(xì)胞為68.8%±4.7%和50.0%±4.5%;轉(zhuǎn)染2種濃度ASODN的SW626和Caov-3細(xì)胞的隨機(jī)運(yùn)動(dòng)能力分別為對(duì)照組的80.0%±1.3%、63.7%±1.9%、72.0%±1.3%和55.9%±2.5%;定向運(yùn)動(dòng)能力分別為對(duì)照組的83.9%±1.4%、64.1%±1.3%、72.5%±3.4%和54.5%±1.9%。轉(zhuǎn)染后2株細(xì)胞的體外黏附能力和增殖能力,均未顯示出明顯的變化。得出結(jié)論,ROCK.1蛋白的表達(dá)與人卵巢癌細(xì)胞的體外侵襲和遷移密切相關(guān),阻斷ROCK-1的表達(dá),可有效地抑制卵巢癌腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移。/**/
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