該項(xiàng)研究目的是構(gòu)建針對(duì)人乙酰肝素酶（HPSE）基因的小干擾RNA（siRNA）及其表達(dá)載體，觀察其對(duì)A375細(xì)胞HPSE基因的干擾作用及其對(duì)腫瘤細(xì)胞體外侵襲的抑制作用。方法采用設(shè)計(jì)并構(gòu)建了重組質(zhì)粒pRNATU6．1／HPSE―siRNA，轉(zhuǎn)染A375細(xì)胞，用實(shí)時(shí)熒光定量PCR法和蛋白質(zhì)印跡法分別測(cè)定HPSE基因RNA和蛋白水平的表達(dá)變化，Matrigel侵襲實(shí)驗(yàn)觀察A375細(xì)胞體外侵襲能力的改變。結(jié)果將針對(duì)HPSE基因的siRNA的雙鏈寡核苷酸片段正確克隆到pRNATU6．1載體；轉(zhuǎn)染A375細(xì)胞，與對(duì)照組比較，HPSE―siRNA組HPSE基因和蛋白的表達(dá)均明顯降低。轉(zhuǎn)染后腫瘤細(xì)胞的體外侵襲能力與對(duì)照組相比受到明顯抑制。由此得出結(jié)論，成功構(gòu)建了針對(duì)HPSE基因的siRNA載體，HPSE―siRNA轉(zhuǎn)染A375細(xì)胞可以顯著降低細(xì)胞HPSE基因和蛋白的表達(dá)。/**/