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嚴重急性呼吸綜合征冠狀病毒刺突蛋白在釀酒酵母中的表達和純化

【?2008-10-09 發布?】 臨床報道  

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    該項研究目的是構建重組表達質粒pYES6-S,誘導SARS冠狀病毒刺突蛋白(spikeprotein)在釀酒酵母中的表達并純化。方法采用反轉錄獲得SARS冠狀病毒DNA片段,PCR法獲得刺突蛋白基因互相重疊的四部分片段,酶切連接成全長,在大腸埃希菌E.coliJM109中構建重組表達克隆pYES6-S,在釀酒酵母巾誘導表達并純化。結果重組克隆pYES6~S經酶切、測序鑒定確定,插入片段大小、方向、堿基匹配與預期一致,獲得1個完整的刺突蛋白基因,表達產物純化后,電泳鑒定,相對分子質量大小近110000。由此得出結論成功克隆SARS冠狀病毒刺突蛋白基因全長,并在釀酒酵母中誘導表達成功,有助于抗SARS分子疫苗的研究。/**/
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