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sCD40基因修飾樹突狀細胞抑制T細胞表型及細胞因子分泌

【?2009-07-21 發(fā)布?】 臨床報道  

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7月21日消息,中國研究者探討sCD40基因修飾樹突狀細胞(DC)對T細胞表型及Th1和Th2類細胞因子分泌的影響及其體外誘導(dǎo)T細胞免疫耐受的機制。

研究者分別以sCD40基因及空載體修飾的13(2(實驗組和對照組)作為刺激細胞,尼龍毛柱法收集Balb/c小鼠淋巴細胞作為反應(yīng)細胞,初次進行混合淋巴細胞培養(yǎng)(MLC)7d。在培養(yǎng)的第1、3、4、5、7天時采用新型四唑氮鹽(MTS)比色法檢測淋巴細胞增殖率;酶聯(lián)免疫吸附(EuSA)法測定培養(yǎng)液上清中的白細胞介素2(IL-2)、γ干擾素(IFN-γ)、白細胞介素4(IL-4)、白細胞介素10(IL-10)水平;第5天采用流式細胞儀檢測CD4^+、CD8^+T細胞上CD25及CD69的表達。再次進行MLC5d,在培養(yǎng)的第1、3、5天時檢測與初次MLC相同的項目,并比較初次及再次MLC后的各項檢測指標(biāo)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)初次及再次MLC后,實驗組(經(jīng)sCD40基因修飾的DC)刺激細胞增殖反應(yīng)明顯低于對照組(空載體修飾的DC)。

初次MLC中,實驗組CD4^+、CD8^+T細胞比例及CD4^+CD25^+、CD8^+CD25^+、CD4^+CD69^+、CD8^+CD69^+T細胞比例明顯低于對照組(P〈0.05);實驗組和對照組培養(yǎng)液上清中IL4和IL-10不能測出,而實驗組培養(yǎng)液上清中IFN-γ和IL-2的水平均明顯低于對照組(P〈0.01)。再次MLC后,培養(yǎng)液上清中IFN-γ、IL-2和IL-4、IL-10的分泌水平均明顯低于對照組(P〈0.01)。

由此,研究者得出結(jié)論,體外MLC體系中,經(jīng)sCD40基因修飾的DC可同時作用于CD4^+和CD8^+T細胞,使CD69和CD25表達降低,引起T細胞早期活化和成熟障礙,抑制T細胞增殖及Th1和Th2類細胞因子的分泌,誘導(dǎo)出T細胞免疫耐受狀態(tài)。

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