（上海）為了獲得具有生物學活性的結核分枝桿菌重組異檸檬酸裂解酶蛋白。研究者以結核分枝桿菌H37Rv基因組為模板，擴增該菌株的異檸檬酸裂解酶基因icl，克隆入原核表達載體pET-28a(+)中，通過在大腸桿菌BL21(DE3)中表達，獲得以鎳離子螯合型瓊脂糖凝膠親和層析柱純化的重組蛋白，并對其酶學性質進行測定分析。結果純化出具有生物學活性的重組結核分枝桿菌異檸檬酸裂解酶.酶學性質測定分析表明，重組異檸檬酸裂解酶ICL的比活力為7.657×102 μmol·mg-1·min-1，反應最適pH值約為7.4。重組蛋白經高效液相色譜及質譜鑒定，測得相對分子質量為50 603.347。在5 mmol/L Tris-Cl緩沖液、pH值7.8、25 ℃條件下，重組ICL的二級結構中相對有43.8 %的α螺旋、31.9%的β折疊、3.4%β轉角、20.9 %無規則卷曲。可見本研究成功克隆表達結核分枝桿菌H37Rv異檸檬酸裂解酶基因，酶學性質鑒定獲得了具有生物學活性的重組蛋白，為該酶免疫學研究及新型抗結核藥物的篩選奠定了基礎。/**/