（湛江）為了構建結核分枝桿菌抗原ESAT-6的真核表達質粒，并研究其免疫原性。研究者采用聚合酶鏈反應(PCR)方法自結核分枝桿菌H37Rv基因組DNA中擴增esat-6基因片段，定向亞克隆入真核表達載體pVAC，構建pVAC-esat-6重組質粒,利用脂質體介導的轉染技術，將其導入Vero E6細胞，RT-PCR法檢測mRNA表達情況，Western-blot法鑒定表達產物；重組質粒經基因槍免疫小鼠后，采用酶聯免疫吸附試驗(ELISA)檢測小鼠血清抗ESAT-6特異性抗體以及小鼠脾淋巴細胞培養上清液干擾素-γ(IFN-γ)含量。結果成功構建了真核表達重組質粒pVAC-esat-6，并可在VeroE6細胞中表達；重組質粒免疫小鼠3次后，抗體滴度達到了1:1600，重組質粒組(pVAC-esat-6組)小鼠脾淋巴細胞培養上清液IFN-γ水平明顯高于對照組(pVAC組)(P＜0.01)。可見成功構建結核分枝桿菌抗原ESAT-6的真核表達質粒pVAC-esat-6，免疫小鼠后誘導產生了特異的體液免疫應答和細胞免疫應答。/**/