（上海）為了構建乙型肝炎病毒(HBV)中國株及其拉米夫定耐藥相關變異株的重組桿狀病毒。研究者將1.2倍HBV基因組(血清adr型、基因C型)連接至桿狀病毒的轉移載體pFastBacI上，然后轉化入DH10Bac菌株中，在細菌內的輔助質粒輔助作用下與桿狀病毒基因組Bacmid發生位點特異性轉座，形成含有HBV基因組的重組Bacmid，轉染昆蟲sf9細胞后，包裝產生HBV重組桿狀病毒vAcHBVc。采用連續聚合酶鏈反應(PCR)引入方法進行定點突變，構建YVDD變異株質粒，并按照上述方法構建HBV YVDD變異株重組桿狀病毒vAcHBVYVDD，擴增并滴定。為便于觀察重組桿狀病毒的轉染和擴增效率及病毒滴度測定，同時構建了含綠色熒光蛋白(GFP)的HBV重組桿狀病毒vAcGFPHBVc。結果 HBV野毒株和變異株重組桿狀病毒均構建成功，通過免疫空斑及TCID50定量測定病毒滴度為106～108pfu/ml左右。可見應用Bac to Bac桿狀病毒表達系統可有效快速地構建HBV C型重組桿狀病毒，以用于HBV體外復制系統的建立，為HBV野毒株及變異株生物學特性的研究及抗病毒藥物的篩選提供技術平臺。/**/