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人工進化丙型肝炎病毒C和E1區噬菌體展示文庫的構建及初步篩選

【?2007-05-07 發布?】 臨床報道  

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    (西安)為了構建人工進化丙型肝炎病毒(HCV)C和E1區基因噬菌體展示文庫,并進行初步篩選。研究者 應用DNA改組技術進行不同基因型的HCV C和E1區基因的人工進化,克隆于噬菌體載體,以輔助噬菌體M13KO7援救后,構建噬菌體展示文庫,應用HCV C和E1區單克隆抗體進行初步篩選。隨機選取篩選后的20個噬菌體克隆,用高滴度HCV陽性血清通過雙抗體夾心酶聯免疫吸附法進行抗原抗體結合反應,以正常人血清作為對照。結果 人工進化HCVC和E1區噬菌體展示文庫庫容達1.64×106,重組率為0.86。以C和E1區單克隆抗體淘篩4輪,噬菌體展示文庫得到特異性富集。篩選獲得12個陽性克隆。可見 所構建的噬菌體展示文庫的庫容和多樣性符合篩選的要求。篩選獲得的陽性克隆具有較好的抗原抗體結合反應活性,表現出較好的親和力。/**/
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