該項研究目的是研究腺病毒介導的HBsAg基因修飾樹突狀細胞（DC）體外誘導對HepG2．2．15肝癌細胞特異性的細胞毒效應。方法采用將HBsAg基因亞克隆到pIND和pShuttle載體中，構建重組載體pShuttle-S。將用PI-SceI和I-CeuI雙酶切后所獲得的HBsAg基因片段與線性化的腺病毒載體pAdeno-X連接，構成腺病毒表達載體AdVHBsAg。經(jīng)HEK293細胞包裝腺病毒后，收獲病毒并做滴度測定，再將AdVHBsAg轉染人單核細胞來源的DC構建AdVHBsAg-DC肝癌瘤苗。采用Westernblot法鑒定轉染基因表達；流式細胞儀檢測表面分子；3↑H-胸腺嘧啶核苷（3↑H-TdR）法檢測T細胞增殖反應的能力；乳酸脫氫酶（LDH）法檢測CTL活性。結果穿梭質粒插入片段為HBsAg基因；包裝的腺病毒載體具有良好的感染性，可在HEK293細胞中形成病毒顆粒；HBsAg基因表達于AdVHBsAg-DC中，表明腺病毒介導的HBsAg基因轉染的有效性；AdVHBsAg-DC可高表達CD1a、CD11C、CD80、CD86和HLA-DR；AdVHBsAg1DC刺激自體T細胞增殖功能明顯高于AdVLacZ-DC組和未轉染的DC組（P〈0．05）；AdVHBsAg-DC體外誘導CTL能夠對表達HBsAg肝癌細胞起到特異性殺傷作用。得出結論，AdVHBsAg可在Dc中表達HBsAg肝癌相關抗原；AdVHBsAg-DC瘤苗可誘導T細胞產(chǎn)生高效的針對HepG2．2．15肝癌細胞的細胞毒效應。/**/