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纖溶酶原激活物抑制劑-1小干擾RNA對肝星狀細胞生物學特性的

【?2008-05-29 發布?】 臨床報道  

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    該項研究目的是研究化學合成纖溶酶原激活物抑制劑-1(PAI-1)小干擾RNA(siRNA)對肝星狀細胞(HSC)PAI-1基因表達及生物學特性的影響。方法采用將化學合成抗PAI-1 siRNA以Lipofectamine包裹,轉染HSC―T6細胞,設陰性對照和空白對照,抽提細胞總RNA及蛋白質,收集培養上清液,應用逆轉錄-聚合酶鏈反應和免疫細胞熒光法檢測細胞PAI―1表達。應用MTT法和流式細胞儀檢測細胞增殖和細胞周期變化,應用酶聯免疫吸附法檢測培養上清液中Ⅰ、Ⅲ型膠原含量。結果轉染siRNA的HSC―T6細胞PAI-1基因表達水平明顯下調,HSC―T6細胞增殖抑制明顯,48h和72h時培養上清液中Ⅰ型膠原表達水平顯著減少,分別比陰性對照下降(20.71±8.40)%和(37.97±6.40)%(F=42.69。P=0.0001),Ⅲ型膠原含量于72h時降低(35.98±4.60)%(F=105.52,P=0.0001)。得出結論化學合成抗PAI-1 siRNA能高效抑制HSC―T6PAI-1表達,抑制HSC―T6細胞增殖,顯著減少Ⅰ、Ⅲ型膠原的合成和分泌,具有預防及治療肝纖維化的潛力。/**/
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